Fosfatase alkalisk (ALP)
Beskrivelse
Alkalisk fosfatase er avledet fra en rekombinant E. coli-stamme som bærer TAB5-genet.Enzymet katalyserer defosforyleringen av 5´- og 3´-ender av DNA- og RNA-fosfomonoestere.Det hydrolyserer også ribose, så vel som deoksyribonukleosidtrifosfater (NTP-er og dNTP-er).TAB5 Alkalisk fosfatase virker på 5' utstikkende, 5' forsenkede og butte ender.Fosfatasen kan brukes i mange molekylærbiologiske applikasjoner, for eksempel kloning eller probeendemerking for å fjerne de fosforylerte endene av DNA eller RNA.I kloningseksperimenter forhindrer defosforylering det lineariserte plasmid-DNA fra selvligering.Det kan også bryte ned ikke-inkorporerte dNTP-er i PCR-reaksjoner for å forberede en mal for DNA-sekvensering.Enzymet inaktiveres fullstendig og irreversibelt ved oppvarming til 70°C i 5 minutter, noe som gjør fjerning av fosfatasen før ligering eller sluttmerking unødvendig.
Bruk
1.Alkalisk fosfatase koblet til proteiner (antistoffer, streptavidin etc.) kan spesifikt identifisere målmolekyler, og kan brukes i ELISA, WB og histokjemisk deteksjon;
2.Alkalisk fosfatase kan brukes til å defosforisere 5'-terminalen til DNA eller RNA for å forhindre selvkobling;
3. Ovennevnte defosforylerte DNA eller RNA kan merkes med radiomerkede fosfater (via T4 polynukleotidkinase)
Kjemisk struktur
Spesifikasjon
Test elementer | Spesifikasjoner |
Enzymaktivitet | 5 U/μL |
Endonukleaseaktivitet | Ikke funnet |
Eksonukleaseaktivitet | Ikke funnet |
Nicking-aktivitet | Ikke funnet |
RNase-aktivitet | Ikke funnet |
E.coli DNA | ≤1 kopi/5U |
Endotoksin | LAL-test, ≤10EU/mg |
Renhet | ≥95 % |
Transport og lagring
Transport:Omgivende
Oppbevaring :Oppbevares ved 2-8°C
Anbefalt ny testLiv:2 år