Alkalisk fosfatase (ALP)

Alkalisk fosfatase er avledet fra en rekombinant E. coli-stamme som bærer TAB5-genet.Enzymet katalyserer defosforyleringen av 5´- og 3´-ender av DNA- og RNA-fosfomonoestere.Det hydrolyserer også ribose, så vel som deoksyribonukleosidtrifosfater (NTP-er og dNTP-er).TAB5 Alkalisk fosfatase virker på 5' utstikkende, 5' forsenkede og butte ender.Fosfatasen kan brukes i mange molekylærbiologiske anvendelser, for eksempel kloning eller probeendemerking for å fjerne de fosforylerte endene av DNA eller RNA.I kloningseksperimenter forhindrer defosforylering det lineariserte plasmid-DNA fra selvligering.Det kan også bryte ned ikke-inkorporerte dNTP-er i PCR-reaksjoner for å forberede en mal for DNA-sekvensering.Enzymet inaktiveres fullstendig og irreversibelt ved oppvarming til 70°C i 5 minutter, og gjør dermed fjerning av fosfatasen før ligering eller sluttmerking unødvendig.