Bst 2.0 DNA-polymerase (glyserolfri, høy tetthet)
Bst DNA-polymerase V2 er avledet fra Bacillus stearothermophilus DNA-polymerase I, som har 5′→3′ DNA-polymeraseaktivitet og sterk kjedeerstatningsaktivitet, men ingen 5′→3′ eksonukleaseaktivitet.Bst DNA Polymerase V2 er ideelt egnet for strengforskyvning, isotermisk amplifikasjon LAMP (Loop-mediert isotermisk amplifikasjon) og rask sekvensering.Denne Bst DNA-polymerase V2 er i stand til å hemme DNA-polymeraseaktivitet ved romtemperatur, slik at den kan betjenes og reaksjonssystemet kan formuleres ved romtemperatur, forhindre uspesifikk amplifikasjon og forbedre effektiviteten av reaksjonen, og denne versjonen kan bli lyofilisert.I tillegg er den i stand til å frigjøre sin aktivitet ved høye temperaturer, og dermed eliminere behovet for et separat aktiveringstrinn.
Komponenter
| Komponent | HC5007A-01 | HC5007A-02 | HC5007A-03 |
| Bst DNA polymerase V2 (glyserolfri) (32U/μL) | 0,05 ml | 0,25 ml | 2,5 ml |
| 10×HC Bst V2 buffer | 1,5 ml | 2×1,5 ml | 3×10 ml |
| MgSO4 (100 mm) | 1,5 ml | 2×1,5 ml | 2×10 ml |
applikasjoner
1.LAMP isoterm forsterkning
2.Enkeltforskyvningsreaksjon med DNA-tråd
3.Høy GC-gensekvensering
4.DNA-sekvensering av nanogramnivå.
Lagringsforhold
Transport under 0°C og lagres ved -25°C~-15°C.
Enhetsdefinisjon
En enhet er definert som mengden enzym som inkorporerer 25 nmol dNTP i syreuløselig materiale på 30 minutter ved 65°C.
LAMPEREaksjon
| Komponenter | 25 μLSystem |
| 10×HC Bst V2 buffer | 2,5 μL |
| MgSO4 (100 mm) | 1,5 μL |
| dNTP-er (10 mM hver) | 3,5 μL |
| SYTO™ 16 Grønn (25×)a | 1,0 μL |
| Primerblandingb | 6 μL |
| Bst DNA-polymerase V2 (glyserolfri) (32 U/uL) | 0,25 μL |
| Mal | × μL |
| ddH2O | Opptil 25 μL |
Merknader:
1) a.SYTOTM 16 Grønn (25×): I henhold til eksperimentelle behov kan andre fargestoffer brukes som erstatninger;
2) b.Primerblanding: oppnådd ved å blande 20 µM FIP, 20 µM BIP, 2,5 µM F3, 2,5 µM B3, 5 µM LF, 5 µM LB og andre volumer.
Reaksjon og tilstand
1 × HC Bst V2-buffer, inkubasjonstemperaturen er mellom 60°C og 65°C.
Varmeinaktivering
80°C, 20 minutter.
