Poly A-bærer-RNA

Kat.nr.: HC4001A

Poly A, polyadenylat, er en blanding av 100 ~ 10000 polyadenylater, som polymeriseres av polynukleotidfosforylase in vitro.In vivo tilsettes poly (a) til 3-terminalen av mRNA ved hjelp av enzym for å forbedre stabiliteten til mRNA.Ved anvendelse av nukleinsyreekstraksjon kan tilsetning av poly A til lysatet eller bindingsløsningen forbedre utbyttet av DNA og RNA.Mekanismenav poly A som forbedrer utbyttet av nukleinsyre er som følger:

1. Mettet kontakt med overflateadsorpsjon av artikler.De fleste polypropylenartikler har statisk elektrisitet på overflaten, som vil adsorbere nukleinsyrer.Bærer-RNA kan mette disseadsorpsjonseffekter og redusere tapet av målnukleinsyrer.

2. Inaktiver spornukleaser: Det er ulike nukleaser i biologiske prøver ogmiljø.Poly A kan inaktivere spornukleaser i ekstraksjons- eller konserveringstrinnene tilforbedre utbyttet og stabiliteten til målnukleinsyrer.

3. Samutfelling: I nukleinsyrerensetrinnet av alkoholmediert utfelling eller binding, kan poly A samtidig utfelles med målnukleinsyren eller danne polymerpartikler for åforbedre utvinningen.

Bruksmetode

Ta en passende mengde lyofilisert pulver, tilsett DEPC-behandlet vann eller guanidinsaltløsning tilløs den opp i 0,1-1 ug/uL, og underpak den og oppbevar den ved -20°C.

applikasjoner

1. Virus-DNA/RNA-ekstraksjon: tilsetning av 1-5 ug bærer-RNA til lysatet kan forbedre utbyttet av RNA/DNA, stabilisere målnukleinsyren og unngå nedbrytning av den rensede nukleinsyren under lagring.

2. I mikro-DNA/RNA-ekstraksjon ved kolonnemembranmetoden (<1 ug) bidrar tilsetning av bærer-RNA til 1-5 ug til å forbedre utbyttet av nukleinsyre.

3. I det alkoholmedierte nukleinsyreutfellings- og konsentrasjonstrinnet er tilsetning av 1-2 ug bærer-RNA nyttig for å forbedre gjenvinningen av kortsegment-RNA.

4. I den kvantitative probe PCR-reaksjonsløsningen er tilsetning av 10-100 ng bærer-RNA til reaksjonsløsningen nyttig for å forbedre følsomheten og redusere C_Tverdi.