DNase I (Rnase-fri) (2u/ul)
Kat.nr.: HC4007B
DNase I er en endonuklease som kan fordøye enkelt- eller dobbelttrådet DNA.Den kan hydrolysere fosfodiesterbindinger for å produsere mono- og oligodeoksynukleotider som inneholder en 5'-fosfatgruppe og en 3'-OH-gruppe.Det optimale pH-området for DNase I er 7-8.Aktiviteten til DNase I avhenger av Ca2+og kan aktiveres av toverdige metallioner som CO2, Mn2+, Zn2+osv. I nærvær av Mg2+DNase I kan tilfeldig spalte et hvilket som helst sete av dobbelttrådet DNA;Mens i nærvær av Mn2+, DNase I kan spalte DNA dobbelttrådet på samme sted, og danne butte ender eller klebrige ender med 1-2 nukleotider som stikker ut.Den kan brukes til behandling av ulike RNA-prøver.
Komponenter
Navn | 1KU | 5KU |
Rekombinant DNaseI (RNase-fri) | 500 μL | 5 × 500 μL |
DNase I-reaksjonsbuffer (10×) | 1 ml | 5 × 1 ml |
Lagringsforhold
Dette produktet bør lagres ved -25~-15 ℃ i 2 år.Vennligst unngå gjentatt frysing-tining.
Bruksanvisning
Brukes kun for fjerning av DNA fra RNA-prøver for referanse.
1. Bruk RNase-frie sentrifugerør og pipettespisser for å forberede følgende reaksjonssystem:
Komponenter | Volum (μL) |
DNase I-reaksjonsbuffer (10×) | 1 |
Rekombinant DNasel (RNase-fri) | 1 |
RNA | X |
RNase-fri ddH2O | Opp til 10 |
2. Reaksjonsbetingelsene er som følger: 37 ℃, etter 15-30 minutter, tilsett en sluttkonsentrasjon på 2,5 mM EDTA-løsning og bland godt, deretter 65 ℃ i 10 minutter.Den behandlede malen kan brukes til påfølgende RT-PCR- eller RT-qPCR-eksperimenter, etc.
Notater
1. DNase l er følsom for fysisk denaturering;Når du blander, snu forsiktig reagensrøret ogrist godt, ikke rist kraftig.
2. Enzymet bør oppbevares i en isboks eller på et isbad når det brukes, og bør lagres ved -20 ℃ umiddelbart etter bruk.
3. Dette produktet er kun for forskningsbruk.
4. Bruk laboratoriefrakker og engangshansker for din sikkerhet.