Ultra Nuclease GMP-kvalitet
Kat.nr.: HC2016A
UltraNuclease GMP-grad er uttrykt og renset i Escherichia coli (E.coli) ved genetisk konstruert og tilberedt under GMP-miljøene.Det kan redusere viskositeten til cellesupernatant og cellelysat i vitenskapelig forskning, øke proteinrensingseffektiviteten og forbedre proteinfunksjonell forskning.Produktet kan også redusere vertsnukleinsyrerester til pg-grad, og forbedre ytelsen og sikkerheten til biologiske produkter av applikasjoner, inkludert virusrensing, vaksineproduksjon og farmasøytisk protein/polysakkaridproduksjon.Dessuten kan produktet også brukes for å forhindre klumping av humane perifere mononukleære blodceller (PBMC) i celleterapi og vaksineutvikling.
UltraNuclease leveres i form av et sterilisert reagens, eluert i buffer (20 mM Tris-HCl pH 8,0, 2 mM MgCl, 20 mM NaCl, 50 % glyserin), med utseendet til en fargeløs, gjennomsiktig væske.Dette produktet er produsert etter GMP-prosesskrav og leveres i flytende form.
Komponenter
UltraNuclease GMP-grad (250 U/μL)
Lagringsforhold
Produktet sendes med tørris og kan lagres ved -25℃~-15°C i to år.
Hvis produktet er åpnet og har vært lagret ved 4℃ i mer enn en uke, anbefaler vi filtreringproduktet for å forhindre mikrobiell kontaminering.
Spesifikasjoner
| Uttrykksvert | Rekombinant E. coli med UltraNuclease-gen |
| Molekylær vekt | 26,5 kDa |
| soelektrisk punkt | 6,85 |
| Renhet | ≥99 % (SDS-SIDE) |
| Lagringsbuffer | 20 mM Tris-HCl pH 8,0, 2 mM MgCl, 20 mM NaCl, 50 % glyserin |
|
Enhetsdefinisjon | Definisjonen av en aktivitetsenhet (U) er mengden enzym som brukes tilendre absorpsjonsverdien til ΔA260 med 1,0 på 30 minutter i en 2,625 mlreaksjonssystem ved 37 ℃ med en pH på 8,0 (tilsvarer fullstendig fordøyelse av37 μg laksesæd-DNA til oligonukleotider). |
Bruksanvisning
1. Prøve Samling
Vedhengende celler: fjern mediet, vask cellene med PBS og fjern supernatanten.
Suspensjonsceller: samle cellene ved sentrifugering, vask cellene med PBS, sentrifuger ved 6000rpm i 10 min, samle pelleten.
Escherichia coli: samle opp bakteriene ved sentrifugering, vask en gang med PBS, sentrifuger ved 8000rpm i 5 min, og samle pelleten.
2. Prøvebehandling
Behandle de oppsamlede cellepelletene med lyseringsbuffer i forholdet masse(g) til volum(mL)1:(10-20), eller ved mekaniske eller kjemiske metoder på is eller ved romtemperatur (1g cellepellet inneholder ca.
109 celler).
3. Enzymbehandling
Tilsett 1-5mM MgCl til reaksjonssystemet og juster pH til 8-9.
Tilsett UltraNuclease i henhold til forholdet 250 enheter for å fordøye 1 g cellepellets, inkuber ved 37 ℃ i mer enn 30 minutter.Vennligst se skjemaet "Anbefalt reaksjonstid" for å velgebehandlingens varighet.
4. Supernatant Samling
Sentrifuger ved 12 000 rpm i 30 minutter og samle supernatanten.
Merk: Hvis løsningen er sur eller alkalisk, eller inneholder høye konsentrasjoner av salt, vaskemidler ellerdenaturanter, vennligst øk enzymdosen eller forleng behandlingstiden tilsvarende.
Anbefalte reaksjonsbetingelserons
| Parameter | Optimal tilstand | Effektiv tilstand |
| Mg²+Konsentrasjon | 1-5 mM | 1-10 mM |
| pH | 8-9 | 6-10 |
| Temperatur | 37℃ | 0-42℃ |
| DTT-konsentrasjon | 0-100 mM | >0 mM |
| Merkaptoetanol Konsentrasjon | 0-100 mM | >0 mM |
| Monovalent kationkonsentrasjon | 0-20 mM | 0-150 mM |
| Fosfat lon Konsentrasjon | 0-10 mM | 0-100 mM |
Anbefalt Reaksjon Tid (37℃, 2 mM Mg²+, pH 8,0)
| Ultranukleasemengde (endelig konsentrasjon) | Reaksjonstid |
| 0,25 U/ml | >10 timer |
| 2,5 U/ml | >4t |
| 25 U/ml | 30 min |
Merknader:
Vennligst bruk nødvendig PPE, slik laboratoriefrakk og hansker, for å sikre din helse og sikkerhet!
