2×PCR Master Mix (uten fargestoff)
PCR Master Mix er en slags konvensjonell PCR ferdigblandet løsning som er klar til bruk, inkludert Taq DNA Polymerase, dNTP mix MgCl2 og optimalisert buffer.Under reaksjonen kan bare primeren og malen legges til for amplifikasjon, noe som i stor grad forenkler operasjonstrinnene i eksperimentet.Dette produktet inneholder utmerkede stabilisatorer og kan lagres i 3 måneder ved 4 ℃.PCR-produktet har 3'-dA-fremspring og kan enkelt klones inn i T-vektor.
Lagringsforhold
Produktet bør lagres ved -25℃~ -15℃ i to år.
Spesifikasjoner
Fidelity (vs. Taq) | 1× |
Varm start | No |
Overheng | 3′-A |
Polymerase | Taq DNA-polymerase |
Reaksjonsformat | SuperMix eller Master Mix |
Reaksjonshastighet | Standard |
Produkttype | PCR Master Mix (2×) |
Bruksanvisning
1.Reaksjonssystem
Komponenter | Størrelse (μL) |
Mal DNA | Passende |
Primer 1 (10 μmol/L) | 2 |
Primer 2 (10 μmol/L) | 2 |
PCR Master Mix | 25 |
ddH2O | Til 50 |
2.Amplifikasjonsprotokoll
Sykle trinn | Temperatur (°C) | Tid | Sykluser |
Pre-denaturering | 94 ℃ | 5 minutter | 1 |
Denaturering | 94 ℃ | 30 sek | 35 |
Gløding | 50-60 ℃ | 30 sek | |
Utvidelse | 72 ℃ | 30-60 sek/kb | |
Endelig utvidelse | 72 ℃ | 10 minutter | 1 |
Merknader:
1) Malbruk: 50-200 ng genomisk DNA;0,1-10 ng plasmid DNA.
2) Mg2+konsentrasjon: Dette produktet inneholder 3 mM MgCl2 egnet for de fleste PCR-reaksjoner.
3) Glødetemperatur: Se den teoretiske Tm-verdien til Primere.Utglødningstemperaturen kan settes til 2-5 ℃ lavere enn den teoretiske verdien til primeren.
4) Forlengelsestid: For molekylær identifikasjon anbefales 30 sek/kb.For genkloning, 60sek/kb anbefales.
Notater
1.For din sikkerhet og helse, vennligst bruk laboratoriefrakker og engangshansker for bruk.
2.Kun til forskningsbruk!